Lymphocyte Separation Medium
淋巴細(xì)胞分離試劑(LSM) -----美國Mpbio公司
用途：
用于體外分離外周淋巴細(xì)胞，也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞，包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
方法概述：
分離混合血液白細(xì)胞早期的方法，總是伴隨紅細(xì)胞聚集，只輕微影響白細(xì)胞。通過離心，紅細(xì)胞密度增加聚集，同時可以從離心管上部收集白細(xì)胞。
Boyum提出了一種更方便，通過使用Ficoll甲泛影鈉溶液離心快速分離方法。稀釋的血液在Ficoll甲泛影鈉溶液中分層，低速短時離心。紅細(xì)胞和沉降到管底的粒細(xì)胞，和單個核細(xì)胞（淋巴細(xì)胞）和血小板可以從兩個分層之間收集。
許多研究者不斷努力，修訂了Boyum方法，MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM，方法的獨(dú)特之處是運(yùn)用泛影鈉成功的代替了甲泛影鈉。
程序原理：
除去血液中的纖維蛋白或肝素處理血液以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30分鐘。通過離心，遷移能力不同最終形成不同的細(xì)胞層。
大部分的紅細(xì)胞和粒細(xì)胞通過梯度遷移形成顆粒狀。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層中間。淋巴細(xì)胞可以通過回抽分層回收，在進(jìn)一步去除血小板，LSM和血漿。
試劑：
LSM是一種滅菌過濾溶液，每100毫升包含6.2克聚蔗糖和9.4克鈉胺。密度是1.0770-1.0800克/毫升20℃
使用說明：
以下的操作步驟是最初由Boyum設(shè)計(jì)的程序的眾多改良版本中的一種。此程序的改良是通過運(yùn)用除去血液中的纖維蛋白或搞凝血劑處理人體血液，這種改良對于其他物種來源血液或者其他組織非常有必要。
1.輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2.無菌轉(zhuǎn)移3mlLSM到15ml離心管中
3.混合2ml除纖維蛋白血液或肝素處理血液和2ml生理鹽水
4.仔細(xì)的將稀釋血液加入3mlLSM（室溫）于15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中
5.室溫下400g離心15-30分鐘，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞同時可以再LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞。
6.吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿
7.吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM和轉(zhuǎn)移到另外的一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至淋巴細(xì)胞離心管中，室溫離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻，例如160-260×一（去除LSM和降低血小板的百分比）
8.用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞，用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
 訂購信息：貨號 品名 規(guī)格
0850494X LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM l00ml
0850494 LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM 5x100 ml
廠家說明：
MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國加利福尼亞州的知名生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN，現(xiàn)在全球有5個大型倉庫，能夠及時供應(yīng)各行業(yè)需求，亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品，是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。
北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司
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