細(xì)胞制劑車間設(shè)計(jì)要點(diǎn)與問題分析

張叔人

中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所

Good Manufacture Practice（GMP）

良好操作規(guī)范

GMP是世界衛(wèi)生組織（WHO），對所有制藥企業(yè)質(zhì)量管理體系的具體要求，1992年實(shí)施。

我 國 《 藥 品 生 產(chǎn) 質(zhì) 量 管 理 規(guī) 范 》 （ Good Manufacture Practice of Medical Products，GMP）根據(jù)《中華人民共和國藥品管理法》、《中華人民共和國藥品管理法實(shí)施條例》， 制定本規(guī)范。1999年8月1日起施行（導(dǎo)致1112家企業(yè)倒閉） 。

新版《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》 自2011年3月1日起施行（500家中小企業(yè)關(guān)停） 。新版GMP已經(jīng)與世界衛(wèi)生組織藥品GMP一致。

Good Manufacture Practice（GMP）良好操作規(guī)范

GMP三大要素是人員、硬件和軟件。

人員是關(guān)鍵，硬件是基礎(chǔ)，軟件是保證 。

優(yōu)秀的機(jī)構(gòu)人員、與生產(chǎn)質(zhì)量相適應(yīng)的硬件、完 善可行的軟件構(gòu)成了生產(chǎn)合格藥品的基本保證

1997年發(fā)布《醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》（簡稱GMP 設(shè)計(jì)規(guī)范）；2009年實(shí)施 《醫(yī)藥工業(yè)潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》 GB50457-2008； 《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》2011年3月1日起施行。

干細(xì)胞臨床研究管理辦法（試行）

國家衛(wèi)生計(jì)生委會同食品藥品監(jiān)管總局聯(lián)合

國衛(wèi)科教發(fā)〔2015〕48號2015年07月20日發(fā)布

第十七條 ……

干細(xì)胞制劑的制備應(yīng)當(dāng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）的基本原則和相關(guān)要求，配備具有適當(dāng)資質(zhì)的人員、適用的設(shè)施設(shè)備……最大限度地降低制備過程中的污染、交叉污染，確保持續(xù)穩(wěn)定地制備符合預(yù)定用途和質(zhì)量要求的干細(xì)胞制劑。

體細(xì)胞制劑特點(diǎn)

規(guī)模小：個(gè)體化制劑（或批量制劑）

多批樣品同期制備，增加交叉污染和混肴差錯(cuò)幾率。

理、化因素對制劑影響大，終產(chǎn)品不能滅菌處理。

有些含有凍存和復(fù)蘇程序。

有些終制劑進(jìn)入人體前不能完成所有檢測。

終制劑有效期短。

細(xì)胞制劑與其他生物制劑的不同點(diǎn)

自體血液骨髓來源的細(xì)胞與

異體組織來源的干細(xì)胞制劑的不同點(diǎn)

體細(xì)胞制劑室位置的選擇

應(yīng)建立在自然環(huán)境良好的區(qū)域，應(yīng)遠(yuǎn)離空氣嚴(yán) 重污染、水質(zhì)嚴(yán)重污染或病原微生物（含未知 或無檢測手段的病原微生物）豐富的場所，應(yīng)遠(yuǎn)離振動(dòng)或噪聲干擾的區(qū)域；

獨(dú)立或相對獨(dú)立

應(yīng)建立并實(shí)施防蟲、防鼠、防花粉等措施，防止無關(guān)動(dòng)植物進(jìn)入關(guān)鍵區(qū)域。

新版各級別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)

2010年新版GMP 附錄1無菌藥品

GMP不同國家有不同標(biāo)準(zhǔn)，ISO國際統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)

注：（1）為確認(rèn)A級潔凈區(qū)的級別，每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣量不得少于1立方米。A級潔凈區(qū)空氣懸浮粒子的級別為ISO 4.8，以≥5.0μm的懸浮粒子為限度標(biāo)準(zhǔn)。B級潔凈區(qū)（靜態(tài)）的空氣懸浮粒子的級別為ISO 5，同時(shí)包括表中兩種粒徑的懸浮粒子。對于C級潔凈區(qū)（靜態(tài)和動(dòng)態(tài)）而言，空氣懸浮粒子的級別分別為ISO 7和ISO 8。對于D級潔凈區(qū)（靜態(tài)）空氣懸浮粒子的級別為ISO 8。測試方法可參照ISO14644-1。（2）在確認(rèn)級別時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計(jì)數(shù)器，避免≥5.0μm懸浮粒子在遠(yuǎn)程采樣系統(tǒng)的長采樣管中沉降。在單向流系統(tǒng)中，應(yīng)當(dāng)采用等動(dòng)力學(xué)的取樣頭。（3）動(dòng)態(tài)測試可在常規(guī)操作、培養(yǎng)基模擬灌裝過程中進(jìn)行，證明達(dá)到動(dòng)態(tài)的潔凈度級別，但培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)要求在“最差狀況”下進(jìn)行動(dòng)態(tài)測試。

98年版與2010年版GMP潔凈區(qū)各級別空氣懸浮粒子標(biāo)準(zhǔn)對照

注：（1）表中各數(shù)值均為平均值。（2）單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4

小時(shí)，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測并累積計(jì)數(shù)。

空氣凈化

細(xì)胞制劑制備質(zhì)量管理自律規(guī)范（中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會）

 干細(xì)胞制劑：第三十五條 應(yīng)按照工藝規(guī)程設(shè)計(jì)相應(yīng)操作區(qū)的潔凈度級別，非完全密封狀態(tài)下的細(xì)胞操作（如分離、培養(yǎng)、灌裝等）以及與細(xì)胞直接接觸的無法終端滅菌的試劑和器具的操作，應(yīng)在 B 級背景下的 A 級環(huán)境中進(jìn)行。

在隔離系統(tǒng)或密閉自動(dòng)制備系統(tǒng)可采用C+A。

干細(xì)胞有些來源于暴露于外環(huán)境的組織（如臍帶、 胎盤等），應(yīng)有獨(dú)立的預(yù)處理間，檢測合格后再進(jìn) 入生產(chǎn)制備區(qū)。

潔凈室內(nèi)的溫度和濕度應(yīng)符合下列規(guī)定GB50457-2008

生產(chǎn)工藝對溫度和濕度無特殊要求時(shí)，

以穿著潔凈工作服不產(chǎn)生不舒服感為宜。

?   100級、10000級區(qū)域：溫度為20～24℃，

（A級    C級）  相對濕度為45～60%。

?   100000級區(qū)域： 溫度為18～28℃

（D級）  相對濕度為50～65%。

噪音控制GB50457-2008

非單向流醫(yī)藥潔凈室的噪聲級不應(yīng)大于60dB，單向流和混合流醫(yī)藥潔凈室的噪聲級不應(yīng)大于65dB。

單向流：百級風(fēng)幕下方為回風(fēng)系統(tǒng)。

潔凈室內(nèi)應(yīng)保持一定的新鮮空氣量

室內(nèi)每人新鮮空氣量不應(yīng)小于40m3/h 。

實(shí)際使用中減少新風(fēng)，以節(jié)約能耗，但前提是要保證人員舒適度，不能覺得悶。 也可選用總風(fēng)量的15%左右作為新風(fēng)量。

新風(fēng)口過濾網(wǎng)要經(jīng)常更換，應(yīng)易于更換。

潔凈室必須維持一定的正壓

不同空氣潔凈度的潔凈區(qū)之間以及潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間的靜壓差不應(yīng)小于10Pa。

同級別制備間和潔凈走廊前者壓力高于后者。

要考慮外排式生物安全柜開啟后，增加的排氣量對壓差的影響。

工藝設(shè)計(jì)

體細(xì)胞生產(chǎn)的工藝流程不同于傳統(tǒng)藥物，規(guī)模小，多批同時(shí)進(jìn)行，人為操作多，為了防止交叉錯(cuò)誤，一個(gè)制備間同期只制備同一批樣品為好。

分別設(shè)置人員和物料的進(jìn)出口通道。

制備區(qū)不設(shè)上下水。如一更室設(shè)洗手池，則排出的潔凈空氣不要回風(fēng)，直接外排不參加再循環(huán)為好。

涉及病毒污染樣品，或應(yīng)用病毒轉(zhuǎn)基因細(xì)胞制劑，應(yīng)考慮人和物單向流。

其他考慮

?   消毒設(shè)施（臭氧、UV燈、過氧化氫等）。

?   CO2管路，接口閥門。

?   閉路監(jiān)視系統(tǒng)，壓差、細(xì)胞庫氮?dú)獗O(jiān)控。

?   塵埃粒子監(jiān)控

?   對講系統(tǒng)

?   物料、試劑、耗材等庫房（待檢、合格區(qū)）。

?   雙路供電。

?   消防：消防設(shè)備，消防通道。

?   防鼠和蚊蟲

?   污水處理

?   純水制備

依據(jù)細(xì)胞制劑特性和生產(chǎn)制備工藝考慮細(xì)胞制劑間設(shè)計(jì)框架

1、非病毒細(xì)菌污染個(gè)體化細(xì)胞制備間，可與同級別潔凈走廊直接相通。垃圾可在潔凈走廊設(shè)統(tǒng)一的污物傳遞窗。

2、病毒陽性細(xì)胞，以及病毒轉(zhuǎn)基因細(xì)胞制備間最好采 用人和物單向流，從潔凈走廊進(jìn)入制備間不再返回。生物安全柜采用外排式。

3、外界暴露過的組織細(xì)胞樣品（臍帶、胎盤等）進(jìn)行 批量制備生產(chǎn)，應(yīng)設(shè)立預(yù)處理間。預(yù)處理間、 人流、物流為獨(dú)立機(jī)組。經(jīng)檢驗(yàn)合格的樣品再傳入生產(chǎn)制 備區(qū)。

4、洗消間人流、物流可設(shè)為獨(dú)立區(qū)域機(jī)組。細(xì)胞制劑

不同于常規(guī)生物制藥，通常采用一次性耗材，無需天天高溫消毒物品，不用不開，可節(jié)省能源。

中國人大網(wǎng)公布了《中華人民共和國藥品管理法（修訂草案）》

第三十八條 開辦藥品生產(chǎn)企業(yè)，必須具備以下條件:

（一）具有依法經(jīng)過資格認(rèn)定的藥學(xué)技術(shù)人員、工程技術(shù)人員及相應(yīng)的技術(shù)工人；

（二）具有與其藥品生產(chǎn)相適應(yīng)的廠房、設(shè)施和衛(wèi)生環(huán)境；

（三）具有能對所生產(chǎn)藥品進(jìn)行質(zhì)量管理和質(zhì)量檢驗(yàn)的機(jī)構(gòu)、人員以及必要的儀器設(shè)備；

（四）具有保證藥品質(zhì)量的規(guī)章制度，并符合國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門依據(jù)本法制定的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范要求。

有些屬于個(gè)人看法僅供大家討論參考

聯(lián)系電話：18059820736

lonza 無血清培養(yǎng)基

康寧/Corning® KBM 581 無血清培養(yǎng)基

細(xì)胞制劑車間設(shè)計(jì)要點(diǎn)與問題分析

購買進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.adsraven.com