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        生物知識(shí)

        細(xì)胞培養(yǎng)常識(shí)(三)

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        冷凍保存細(xì)胞之方法?

        冷凍保存方法一:冷凍管置于4度30-60分鐘至-20度30分鐘至-80度16-18小時(shí)(或隔夜)至液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。

        冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3度至-80度以下,再放入液氮中長期儲(chǔ)存。-20度不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80度冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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        這細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)有多少細(xì)胞濃度

        冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1*106 cells/ml vial, 融合瘤細(xì)胞則以5*106 cells/ml vial 為宜。

         

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        可否使用應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?

        細(xì)胞污染的種類可分為細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌、主要的污染源因?yàn)闊o菌操作記住不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之最好方法。

         

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        這支原體污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?

        不能。除極有經(jīng)驗(yàn)之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無法以其外觀分辨之。

         

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        CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?

        定期(至少每兩周一次)以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。

         

         

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