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        生物知識

        鱟試劑分類及選購-內(nèi)毒素檢測新手必看

        作者:admin 來源:網(wǎng)絡(luò) 發(fā)布時間: 2015-01-10 21:33  瀏覽次數(shù):
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        Lonza內(nèi)毒素檢測試劑產(chǎn)品目錄

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        LONZA鱟試劑資料

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        鱟試劑分類及選購-內(nèi)毒素檢測新手必看
        顯色基質(zhì)鱟試劑、凝膠法鱟試劑、特異性鱟試劑、動態(tài)濁度法鱟試劑、比色法鱟試劑、顯色法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑、濁度法鱟試劑 、動態(tài)比濁法鱟試劑、棄G因子鱟試劑、終點顯色法鱟試劑...。

        如果你是一位剛準備做細菌內(nèi)毒素檢測的實驗人員,看到有這么多種鱟試劑,是不是有個疑問:“這么多種鱟試劑,我該怎么選擇呢?”
        別急,不要被這么多名字嚇到了,以下為您詳細分類介紹;
        首先,知道什么是鱟試劑。鱟試劑是從棲生于海洋的節(jié)肢動物“鱟”的蘭色血液中提取變形細胞溶解物,經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑,專用于細菌內(nèi)毒素檢測。

        按原料來源分:
        全世界有5個種屬的鱟,其中僅有中國鱟(又名三刺鱟)Tachypleus tridentatus Leach和美洲鱟

        Limulus polyphemus Linnaeus可制造鱟試劑,對應生產(chǎn)出來的鱟試劑分別為中國鱟鱟試劑
        (Tachypleus Amebocyte Lysate),縮寫為TAL;美洲鱟鱟試劑(Limulus Amebocyte Lysate),
        縮寫為LAL。TAL與LAL有相同的功效。

        按方法分:
        中國藥典2005年版中收錄了2種細菌內(nèi)毒素檢查法,即凝膠法和光度測定法,后者包括濁度法和
        顯色基質(zhì)法。供試品檢測時,可使用其中任何一種方法進行試驗。當測定結(jié)果有爭議時,除另有
        規(guī)定外,以凝膠法結(jié)果為準。
        05年中國藥典附錄細菌內(nèi)毒素檢查法詳見http://www.houshiji.com/newslist.asp?newsid=135&sort=2

        凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量,使用時應加無熱原水(細菌內(nèi)毒素檢查用水)復溶后使用。2005年版藥典中凝膠法鱟試劑結(jié)果的判斷:保溫60分鐘±2分鐘后觀察結(jié)果。部分商家所說的半小時出結(jié)果的快速凝膠法鱟試劑是沒有依據(jù)的,沒到時間就觀察結(jié)果可能導致假陰性。特異性鱟試劑(又叫棄G因子鱟試劑)是凝膠法鱟試劑的一種,細菌內(nèi)毒素及β-葡聚糖均能與鱟試劑發(fā)生凝聚反應。特異性鱟試劑就是屏蔽β-葡聚糖引起的鱟試劑凝聚反應,使鱟試劑僅與內(nèi)毒素起反應。一般中草藥注射液成份復雜,干擾因素較多,常含有β-葡聚糖或內(nèi)毒素類似物。用特異性鱟試劑能減少或消除假陽性反應。(應做對比及干擾試驗)。

        光度測定法分為濁度法和顯色基質(zhì)法,這2種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的。
        濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應過程過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。根據(jù)檢測原理,可分為終點濁度法和動態(tài)濁度法。終點濁度法未見與商品化產(chǎn)品,不再贅述。動態(tài)濁度(比濁)法是檢測反應混合物的濁度到達某一預先設(shè)定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度的方法。

        顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法,因使用分光光度計或酶標儀器,又稱為比色法。根據(jù)檢測原理,分為終點顯色法和動態(tài)顯色法。國內(nèi)已有顯色基質(zhì)鱟試劑盒(終點法),早期有上海伊華以鱟三肽為原料做成的鱟試劑盒,廈門鱟試劑廠于2005推出以鱟四肽為原料的鱟試劑盒,也有少量國外產(chǎn)品,但到貨周期長,價格遠高于國產(chǎn)試劑。動態(tài)比色法與終點比色基本原理差不多。國產(chǎn)暫無動態(tài)比色法,相信很快就會面市。

        如果您是藥廠、醫(yī)院、醫(yī)療器械廠商等單位的實驗人員,僅需要檢測樣品的內(nèi)毒素限量,則應選擇凝膠法鱟試劑,通過確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù),做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。
        如果您需要定量測定樣品中內(nèi)毒素含量則應選擇顯色基質(zhì)鱟試劑或動態(tài)濁度法鱟試劑。
        動態(tài)濁度法鱟試劑一般需要配備專用的動態(tài)濁度儀或帶有特定軟件的酶標儀,比較適合樣品量較多的用戶(。顯色基質(zhì)鱟試劑用酶標儀或分光光度計檢測。是樣品數(shù)較少(少于200-300個),設(shè)備比較簡陋的用戶。如果已有內(nèi)毒素檢測專用酶標儀,則可選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑。
        簡單的說,鱟試劑就2種:定性和定量,定性就選凝膠法(特殊產(chǎn)品用特異性鱟試劑)。定量就是顯色法鱟試劑盒或動態(tài)濁度法鱟試劑(根據(jù)已有儀器定)。如果有動態(tài)比色法鱟試劑那就多一種選擇(當然要看成本)。
        相信通過以上介紹您對鱟試劑已經(jīng)有一定了解,聰明的你一定知道如何去選擇鱟試劑了吧!


        特別說明:由于環(huán)境污染等原因,鱟的數(shù)量在不斷減少。臺灣澎湖海洋生物研究中心黃丁士副研究員正在做養(yǎng)殖鱟的研究,他培育出12000尾剛孵化的“一齡鱟”, 60天后有250尾脫殼成“二齡鱟”,僅有少部分“二齡鱟”再經(jīng)歷2周成為“三齡鱟”。“二齡鱟”到“三齡鱟”的階段存活率只有5%,人工繁殖技術(shù)上一直未能突破“三齡鱟”的瓶頸而停滯。日本也曾經(jīng)劃出鱟保護區(qū),專門用來進行人工養(yǎng)殖鱟,但經(jīng)過多年實驗以失敗告終。鱟的產(chǎn)卵量很大,但是能活到成年的比例很小。一只鱟必需脫殼15到16次,需要15年達到成年,只有成年鱟才可以采血,因此人工養(yǎng)殖鱟基本上不太可能。部分酒家所謂的人工養(yǎng)殖大多是將成年鱟圈養(yǎng)起來。部分保護動物是可以經(jīng)營利用的,前提是,被經(jīng)營利用的必須是這些野生動物經(jīng)人工養(yǎng)殖繁殖的后代。 因此所有酒家經(jīng)營的鱟都是非法的。目前日本等國由于鱟的數(shù)量減少不得不進口美洲鱟及中國鱟原料來生產(chǎn)鱟試劑。因此,請看到此文的朋友不要吃鱟,也請轉(zhuǎn)告您身邊的親朋好友保護它。
         

         

        LONZA鱟試劑資料

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