血友病A是常見的遺傳性凝血障礙，它是由凝血因子Ⅷ的基因缺陷而致其功能異 常的致其發病率改為1/1000男性，女性患者極為少見.在臨床上，血友病大都有家族 史，亦有約20～30%的患者為散發病例，為新生基因突變所致.

一、血友病的遺傳學

　　本病為X連鎖隱性遺傳病，其基因定痊于Xq28.因子Ⅷ(FVⅢ)基因全長約為186Kb， 包括26個外顯子和25個內含子，其mRNA全長約為9Kb，CDNA占為9009bp.其翻譯產物為 2351個aa殘基的多肽鏈.在FVⅢ基因內含有多個酶切位點，在其翻譯區尚有VNTR序列 及(CA/n重復序列.

二、FVⅢ基因突變的特點

　　(一)大范圍的缺失，重排，重復及括入僅點血友病A的5%

　　(二)FVⅢ基因突變的主要類型為單堿置換所引起的點突變，目前還發現的單堿是 置及在八十種以上，幾乎涉及FVⅢ的所有外顯子和部分內含子.

三、PCR技術在血友病A基因產前診斷中的應用

　　FVⅢ基因突變以點突變為主，而且有高度異質性，因此對患者的診斷10前還是主 要依據臨床表現進行，在一個家系內若要進行血友病A的產前診斷，則必須用連鎖分 析的方法，該方法的應用則必須滿折方法有以下兩種:

(一).PCR-RFLP

　　在因子組基因內及其復側有多組RFLP位點可用為標記進行連鎖分析進行產前診 斷，常用的PCR-RFLP位點有兩種，其引物序列，酶切片段多者情況見下表.

(二)，Amp-FLP

　　在FVⅢ區內尚有兩個VNTP區，一個位于DXS52，另一個為(CA)n位于DX102內，它 仍均具有復雜的多者性，亦可用于連鎖分析，是引物及擴增產物的多者性見下表

(三)血友病APCR基因診斷程序

　　1.母親、先證者的RFLP及Amp-FLP，確定風險染色體

　　2.檢測胎兒性別(SRT)

　　3.檢測胎兒的RFLP及AmP-FLP

四、散發病例FVⅢ基因突變的PCR檢測

　　由于因子FVⅢ的基因突變以點突變為主，而且具有高度特異性，因此，單獨網點 突變的檢測方法仍以診斷，對于形發病例來說，可用PCR-SSCP，PCR-DGGE及其它的點 突變是篩查方法確定點突變血友病A之間的關系具有重要意義，尤其是PCR-DGGE已用 于血友病A基因點突變的篩查.

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