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        生物知識

        常用培養(yǎng)基及抗生素配置

        作者:admin 來源:網(wǎng)絡(luò) 發(fā)布時間: 2010-05-30 21:53  瀏覽次數(shù):
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        LB培養(yǎng)基
        將下列組分溶解在0.9L水中:

        蛋白胨
        10g
        酵母提取物
        5g
        氯化鈉
        10g

        如果需要用1N NaOH(~1ml)調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
        SOB培養(yǎng)基
        將下列組分溶解在0.9L水中:

        蛋白胨
        20g
        酵母提取物
        5g
        氯化鈉
        0.5g
        1 mol/L 氯化鉀
        2.5ml


        用水補足體積到1L。分成100ml的小份,高壓滅菌。培養(yǎng)基冷卻到室溫后,再在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂。
        SOC培養(yǎng)基
        成分、方法同SOB培養(yǎng)基的配制,只是在培養(yǎng)基冷卻到室溫后,除了在每100ml的小份中加1ml滅過菌的1mol/L氯化鎂外,再加2ml滅菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足夠水中,再用水補足到100ml,用0.22um的濾膜過濾除菌)。
        TB培養(yǎng)基
        將下列組分溶解在0.9L水中:

        蛋白胨
        12g
        酵母提取物
        24g
        甘油
        4ml

        各組分溶解后高壓滅菌。冷卻到60℃,再加100ml滅菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使終體積為100ml。高壓滅菌或用0.22um的濾膜過濾除菌)。
        2×YT培養(yǎng)基
        將下列組分溶解在0.9L水中:

        蛋白胨
        16g
        酵母提取物
        10g
        氯化鈉
        4ml

        如果需要用1N NaOH(~1ml)調(diào)整pH至7.0,再補足水至1L。注:瓊脂平板需添加瓊脂粉12g/L,上層瓊脂平板添加瓊脂粉7g/L。
        YPD培養(yǎng)基
        將下列組分溶解在0.9L水中:

        蛋白胨
        20g
        酵母提取物
        10g
        葡萄糖
        20g

        用水補足體積為1L后,高壓滅菌。建議在高壓滅菌之前,對色氨酸營養(yǎng)缺陷型每升培養(yǎng)基添加1.6g色氨酸,因為YPD培養(yǎng)基是色氨酸限制型培養(yǎng)基。為了配制平板,需要在高壓滅菌前加入20g瓊脂粉。


        氨芐青霉素(ampicillin)(100mg/ml)
        溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        羧芐青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
        溶解0.5g羧芐青霉素二鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
        溶解1g甲氧西林鈉于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以37.5ug/ml終濃度與100ug/ml氨芐青霉素一起添加于生長培養(yǎng)基。
        卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
        溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
        溶解250mg氯霉素足量的無水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        鏈霉素(streptomycin)(50mg/ml)
        溶解0.5g鏈霉素硫酸鹽于足量的無水乙醇中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
        溶解50mg萘啶酮酸鈉鹽于足量的水中,最后定容至10ml。分裝成小份于-20℃貯存。常以15ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
        四環(huán)素(tetracyyline)(10mg/ml)
        溶解100mg四環(huán)素鹽酸鹽于足量的水中,或者將無堿的四環(huán)素溶于無水乙醇,定容至10ml。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見光,于-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。

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