很多細胞治療領域的小伙伴提起康寧KBM581培養基并不陌生。在CIK培養過程中，581以高細胞擴增倍數、突出的細胞表型和出色的殺傷活力在眾多無血清培養基中脫穎而出。甚至在NK的培養過程中，581也表現優異，不僅可以促進細胞因子和抗體活化的NK細胞高效擴增，對于飼養層細胞支持的NK細胞培養也效果顯著。小編今天要跟大家分享的是，581還能支持T細胞，尤其是如今在細胞治療領域大熱的CAR-T細胞培養，即使在完全無血清條件下，足夠的CAR-T細胞數量可以滿足，其表型也能支持目前臨床試驗的需求。

以下的數據來源于國內知名CAR-T細胞治療企業的臨床試驗。

研究人員首先對比了包括KBM581在內的不同品牌的5種無血清培養基在化療病人血液樣本制備CAR-T細胞中的效果。B-ALL病人在采血前不久接受了化療，分離到PBMC后，用T細胞分選試劑盒進行T細胞分選，然后用CD3/CD28磁珠活化，同時加入IL-2進行細胞培養；培養第3天，用連接有CD19-CAR基因的慢病毒載體轉導細胞，繼續培養到第14天。與其它商品化的淋巴細胞培養基相比，581和另一品牌產品Competitor1（Competitor1和Competitor2都被認為是最經典的淋巴細胞培養基）獲得了最高的擴增效率（8倍，Figure1a）。細胞表型檢測結果顯示581和Competitor1的T細胞純度、CTL比例都符合該實驗室要求。CD8+的CTL比例都超過80%，提示較高的殺傷活性。

figure 1a

figure 1b

Figure1 不同品牌培養基培養CAR-T細胞擴增倍數和細胞表型比較

隨后研究人員比較了581與Competitor1在普通未接受放、化療B-ALL病人樣本中，CAR-T細胞的擴增情況。用同樣的分離、刺激和培養方法擴增11天，581體系中CAR-T細胞擴增42.8倍，高于Competitor1的40.5倍，生長曲線顯示581具有推遲的對數生長期和更高的擴增潛能（Figure2，由于回輸的需要，細胞未繼續擴增）。在其他B-ALL病人和健康人樣本中，研究人員也獲得了相似的結果。

figure 2

另一個國內著名CAR-T細胞研發企業對581和Competitor2 的對比實驗發現，581與Competitor2培養的CAR-T細胞擴增倍數、細胞活率及表型（CD3/CD4/CD8亞群比例,Tn/Tcm/Tem亞群比例，PD-1+細胞比例等）方面沒有顯著差異，二者都可以支持T細胞尤其是CAR-T細胞的高效擴增。

綜上，581作為一種營養豐富的無血清培養基，不僅適合CIK、NK細胞的培養，也適用于T細胞，尤其是CAR-T細胞的擴增，是目前細胞治療臨床試驗和研究的最優選擇。

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