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| 細(xì)胞培養(yǎng)在科研領(lǐng)域里面算是成本費用比較高的其中一項，很多客戶問我們廠家為什么我們把細(xì)胞產(chǎn)品發(fā)貨到他們手上的時候細(xì)胞長勢以及傳代能力很好，客戶自己培養(yǎng)一段時間后細(xì)胞長勢不行甚至死亡?在此恒遠(yuǎn)小編告訴您細(xì)胞培養(yǎng)不容馬虎大意，正確的細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作如下： 1. 實驗進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進(jìn)行下一個細(xì)胞株的操作。 2. 無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。 3. 小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。 4. 工作人員應(yīng)注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進(jìn)行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺(至少Class II)。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol 的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖銳針頭的傷害等。 5. 定期檢測下列項目： (1). CO2 鋼瓶的CO2 壓力 (2). CO2 培養(yǎng)箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。 (3). 無菌操作臺內(nèi)的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)(300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000 小時/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒劑(Zephrin 1:750)，定期更換水槽的水。 LONZA細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)-產(chǎn)品目錄 http://www.adsraven.com/a/gb2312/product/lonza/xbpy/2010/0928/3758.html |
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